Methoden

Elektrophysiologie

Ableitung von Mikrophonpotentialen, Summenaktionspotentiale, Einzelfaserableitungen, Hirnstammevozierte Potentiale, Einzelzell- und Mehrzellableitungen im Colliculus inferior, Lokale Feldpotentiale, Einzelzell- und Mehrzellableitungen. Stimulation: Akustisch, elektrisch, somatosensorisch und visuell.

Datenauswertung:

• Stromquellendichteanalysen und Frequenzanalysen von Feldpotentialen, Independent-Component-Analyse, Korrelationsanalyse; Analysen von cortikalen Wanderwellen
• Einzelzell- und Mehrzellableitungen:
  • "Spike-Sorting", Histogramme (PSTH, IH, Synchron-Index)

  • Curve-Fitting, Korrelationsanalyse

Siehe auch ---->

Histologie

Färbung von histologischen Schnitten von Nervengewebe und der Cochlea mit Hilfe von klassichen Färbemethoden und Immunohistochemie, Darstellung der Cochlea mit Feinschliffmethoden

Insertionsstudien

Minimal-invasiver Zugang zur Cochlea in Form einer Stichkanalbohrung bei Unversehrtheit der relevanten Risikostrukturen der lateralen Schädelbasis (N. facialis, Chorda tympani, äußerer Gehörgang und Gehörknöchelchen).

Versuchsaufbau zur Kraftmessung bei automatisierter Insertion der Contour Advance CI-Elektrode in ein transparentes Kunststoffmodell der Cochlea zur Korrelation von auftretenden Kräften und intracochleärem Krümmungsverhalten der vorgeformten Elektrode.

Simulation auf Basis der Finite-Elemente-Methode (FEM) als Basis einer computergestützten Implantatentwicklung zur Ermittlung der Implantat-Gewebe-Interaktion.

Molekularbiologie

Proteinbestimmung, SDS-Gelelektrophorese, Western Blotting, Aufreinigung von Proteinen durch Säulenchromatographie, Aminosäureanalyse und Sequenzierung, Herstellung und Applikation von mono- und polyklonalen Antikörpern, u. a. FACS-Analysen, ELISA, Immunzyto- und -histochemie, Quantifizierung des Kohlenhydratanteils von Glykoproteinen.

Spezialkenntnisse in der Strukturanalytik des Kohlenhydratanteils von Glykoproteinen: spezielle chromatografische (HPLC, FPLC, "Dionex") und enzymatische Verfahren (Sialidase, PNGaseF etc.), massen- (FAB, ESI, MALDI) und kernresonanzspektroskopische Methoden

Isolierung und Charakterisierung von Nukleinsäuren (RNA, DNA), Synthese von cDNA, PCR und RT-PCR (semiquantitativ, quantitativ), Klonierung und DNA-Sequenzierung, Extraktion genomischer DNA aus extrem kleinen Gewebestücken, PCR- und RFLP-Verfahren zur Analyse von Genpolymorphismen, Northern Blotting, In-situ-Hybridisierung.

Expression von Proteinen in eukaryontischen Zell-Linien und in Primärzellen (plasmidbasiert, adeno-/lentiviral)

Arbeiten mit siRNA/miRNA

Spezialkenntnisse verschiedener Signaltransduktionswege und Techniken wie "Yeast Two Hybrid System", Co-Immunpräzipitation, Phosphorylierungsanalytik

Isolierung und Charakterisierung von mesenchymalen Stammzellen und ihre gentechnische Manipulation

Optoakustik/Mittelohrmechanik

Akustische und vibromechanische Stimulation der Cochlea, Methoden zur Ankopplung implantierbarer Hörprothesen, Laserdopplervibrometrie, Stimulation des Innenohres mit gepulsten Laser, Patch-Clamp-Technik, Isolation von Haarzellen

Drug Delivery

• Zellkultur (L929, NIH/3T3, PC-12, fluoreszenzmarkierte Zelllinien, Spiralganglienzellen)
• Elektrostimulation kultivierter Zellen mit und ohne Medikamentenzusatz
• in vivo (verschiedene Spezies)
  • Biokompatibilitätstestung (funktional mittels BERA, histologisch s.u.)

  • Biofunktionalitätstestung (mittels BERA, histologisch s.u.)

  • Drug Delivery
    • via Cochleostomie

    • via Rundfenstermembran

    • mittels osmotischer Pumpen

    • mittels Kathetersystemen

    • in Kombination mit Cochlea-Implantat Elektroden
• Untersuchung von Substanzfreisetzung und -verteilung im Cochlea Modell bei Nutzung verschiedener Wege des Drug Delivery, hauptsächlich in Verbindung mit Cochlea-Implantat Elektroden
• Histologie: Paraffinschnitte, Schlifftechnik, surface preparation, Kryosectioning
• Imaging: Fluoreszensmikroskopie, Klimakammer, CLSM, Immunhistochemie